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【摘 要】目的 将全长γ9 链mRNA和肿瘤反应性CDR3移植的δ2链mRNA共转染到抗CD3抗体刺激的PBMC，制备CDR3δ2基因修饰型γδ T淋巴细胞，研究其抗肿瘤作用。方法 通过PCR扩增含有肿瘤反应性特异CDR3δ2序列（OT3和OT10）的TCR δ2链及γ9链，构建重组质粒pGEM4Z/δ2（OT3）/A64、pGEM4Z/ δ2（OT10）/ A64和pGEM4Z/γ9/A64；以线性化的重组质粒作为模板，体外合成δ2（OT3）、δ2（OT10）和γ9 mRNA；将δ2（OT3） mRNA和δ2（OT10） mRNA分别与γ9 mRNA共电转染入抗CD3抗体刺激的正常人PBMC；经流式细胞术检测和分选γ9δ2（OT3） T细胞和γ9δ2（T10）T细胞。ELISA及MTT法分别检测上述转染细胞的抗肿瘤作用。结果 CDR3δ2基因修饰的TCRγδ细胞γ9δ2（OT3）T细胞和γ9δ2（T10） T细胞能够分泌较高的IFN-γ及TNF-α（P〈0.05），对多种肿瘤细胞具有显著的细胞毒作用（P〈0.05）。结论 基因修饰型γ9δ2 T细胞能够明显增强对肿瘤的杀伤活性，为肿瘤过继免疫细胞的制备提供了新的策略。