miR-378负性调节caspase-3蛋白表达减轻氧.糖剥夺致小鼠N2A细胞缺血损伤
【出 处】:
【作 者】:
【摘 要】目的探讨miR-378在氧.糖剥夺(OGD)致小鼠成神经瘤N2A细胞缺血损伤中的作用及其可能分子机制研究。方法离体培养N2A细胞,采用3hOGD/24h复糖复氧模拟缺血/再灌细胞模型,3-(4,5.二甲基噻唑).2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTr)比色法检测N2A细胞生存率,蛋白印迹(Westernblot)检测caspase-3蛋白表达,实时定量RT-PCR检测miR-378和caspase-3mRNA表达,荧光素酶报告基因验证miR-378对caspase-3mRNA3'非翻泽区(UTR)的直接调控作用。结果miR-378在N2A细胞内表达水平,随着3hOGD复糖复氧时间的增加,而显著降低(P〈0.05,n=5);在3hOGD/24h复糖复氧致N2A细胞缺血损伤中,上调或下调rniR-378的表达水平可显著提高或降低N2A细胞生存率(P〈0.05,n=6);而在非OGD条件下,miR-378表达水平改变对N2A细胞生存率则无明显影响;同样,在3hOGD/24h复糖复氧条件下,miR-378表达水平的改变可显著影响caspase-3蛋白表达(P〈0.05,n=3)而非caspase-3mRNA表达水平;共转染pri-miR-378可显著抑制含caspase-3mRNA3'-uTR的荧光素酶报告基因的表达(P〈0.05,n=6)。结论miR-378可通过负性调节caspase-3蛋白表达水平,来减轻OGD致N2A细胞缺血损伤,所获实验结果有助于从miRNAs水平为缺血性脑卒中提供潜在的治疗靶点。
相关热词搜索: 氧-糖剥夺 缺血性损伤 而R-378 caspase-3 N2A细胞
上一篇:脑内源性cPKCgamma水平影响缺血性卒中小鼠脑梗死体积和神经功能损伤
下一篇:hTERT和survivin双靶点RNAi表达载体的构建及对人结肠癌SW480细胞的抑制作用