【出 处】：

【作 者】： 贺涛 [1] ; 崔宏 [1] ; 王云检 [1] ; 黄长山 [1] ; 黄涛 [1] ; 韩风 [1] ; 张玲 [1]

【摘 要】目的建立稳定表达AFP-siRNA质粒的肝癌细胞系并探讨对其增殖的影响。方法构建AFP-siRNA,用脂质体法转染肝癌细胞系,G418筛选4～5周,Western blot及RT-PCR检测靶基因表达,分组：实验组、转染AFP-siRNA组;阳性对照组、转染空载体组;空白对照组、未处理组。MTT绘制生长曲线,平板克隆实验观察集落形成,流式细胞仪分析细胞周期。结果成功建立稳定表达AFP-siRNA的肝癌细胞系,实验组表达AFP近乎完全抑制;实验组增殖能力显著低于空载体组;实验组〉75μm集落形成数19±2,低于空载体组62±6;实验组G1期细胞数较空载体组提高20%左右。结论成功建立稳定表达AFP-siRNA的肝癌细胞系,抑制AFP表达可使肝癌细胞发生G1期阻滞,明显抑制其增殖及集落形成能力。