人食管癌间充质干样细胞分离培养及生物学特性鉴定
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【作 者】:
【摘 要】目的探讨人食管癌间充质干样细胞(hEC-MSCs)体外分离培养方法,并对其生物学特性进行鉴定。方法用胶原酶消化法分离培养hEC-MSCs,RT-PCR检测基因表达,流式细胞仪检测表面标记和细胞周期,绘制生长曲线,检测染色体核型,成骨诱导和心肌诱导检测其多向分化潜能。结果胶原酶消化法分离的hEC-MSCs呈长梭形样,细胞增殖迅速,表达干细胞转录因子Oct-4、Nanog及间质细胞相关基因波形蛋白和N-钙黏蛋白,不表达E-钙黏蛋白;表达间充质干细胞(MSCs)相关表面标记CD13、CD29、CD44、CD105,不表达CD33、CD45、CD133、CD14、CD34及HLA-DR。细胞周期分析显示多数细胞处于G0/G1期,少数在S和G2/M期。细胞内含有46条染色体,形态正常;具有分化为成骨细胞及心肌细胞的潜能。结论胶原酶消化法能有效分离hEC-MSCs。
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