大鼠骨髓间充质干细胞旁分泌HGF上调肝星状细胞DR5及caspase-8的表达
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【摘 要】目的观察大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)旁分泌肝细胞生长因子(HGF)对肝星状细胞(HSCs)死亡受体-5(DR5)及caspase-8的影响。方法应用6孔培养板建立双层细胞共培养体系,分A组:对照组;B组:共培养组;C组:TNF-α预处理组;D组:HGF-ShRNA干扰组。ELISA法检测上清液中HGF及TRAIL的浓度;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡;荧光定量-PCR、Western blot分别检测DR5、caspase-8 mRNA和蛋白的表达。结果 1)TNF-α预处理组中HGF的浓度明显高于BMSCs组及对照组(P〈0.01);BMSCs组中TRAIL的浓度明显高于其他3组(P〈0.01)。2)TNF-α预处理组中HSCs凋亡率明显高于其他3组且呈时间依赖性(P〈0.01);HGF-ShRNA干扰组中HSCs的凋亡率低于共培养组,高于对照组(P〈0.01)。3)共培养组及TNF-α预处理组DR5、caspase-8 mRNA及蛋白表达量明显高于对照组及HGF-ShRNA干扰组(P〈0.01)。结论 BMSCs旁分泌HGF能上调DR5及caspase-8的表达促进HSCs的凋亡。
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