低氧对食管癌Eca109细胞体外迁移及侵袭的影响
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【摘 要】目的探讨低氧对食管癌迁移及侵袭能力的影响及其作用机制。方法采用CoCl2化学低氧法模拟肿瘤低氧微环境,半定量RT.PCR和免疫细胞化学分别检测不同低氧时相时食管癌Eca109细胞中低氧诱导因子-1a(HIF-1a)、E-钙黏蛋白及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)mRNA及蛋白的表达。Western印迹法检测雷帕霉素联合低氧处理Eca109细胞后,HIF-1a、E-钙黏蛋白及MMP-2的变化。细胞划痕试验和Transwell实验检测雷帕霉素联合低氧对Eca109细胞迁移及侵袭能力的影响。结果Eca109细胞在低氧状态下,HIF-1mRNA无明显变化,仅蛋白表达增多;E-钙黏蛋白的mRNA表达明显降低(P〈0.05),蛋白表达减少;MMP-2mRNA表达明显升高(P〈0.05),蛋白表达增多。雷帕霉素在低氧状态下可显著抑制HIF-1a及MMP-2表达,促进E-钙黏蛋白高表达。经雷帕霉素处理后,Eca109细胞在低氧状态下,迁移速度减慢,侵袭穿膜细胞数减少(P〈0.05)。结论低氧使Eca109细胞中HIF-1a蛋白表达增多,后者可能通过下调E-钙黏蛋白、上调MMP-2表达促进食管癌在低氧状态下的迁移及侵袭。
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