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【作 者】：

【摘 要】目的构建PLCE基因的shRNA表达载体转染膀胱癌细胞T24株，观察其对T24细胞转移侵袭等恶性行为的影响。方法设计合成PLCE基因mRNA的寡核苷酸序列，插入绿色荧光蛋白质粒真核表达载体pGenesil中，构建重组载体pGenesil-PLCs。重组载体转染T24细胞后，RT-PCR和Westernblot检测PLCE基因和蛋白表达；以侵袭小室、明胶酶谱分析及免疫组化检测细胞侵袭能力。结果成功构建了针对PLCE基因的shRNA表达载体。两个阳性重组质粒P1和P2转染膀胱癌细胞T2d，P1和P2组目的基因／内参照吸光度比值较空载HK—A组明显降低（P〈0．01）；P1和P2组目的蛋白／内参照吸光度比值较空载HK-A组明显降低（P〈0．01）。细胞侵袭实验中阳性质粒P1和P2转染组穿膜细胞数也明显低于空白对照组和阴性质粒HK-A转染组（P〈0．01）；转染P1、P2均使细胞分泌MMP-2、MMP-9明显低于空白对照和HK-A转染组（P〈0．01）。结论阻断PLCE基因能有效抑制膀胱癌T24细胞系中PLCE基因和蛋白表达，并对T24细胞的侵袭转移能力具有一定的抑制作用。