脂多糖促进大鼠肝星状细胞系HSC-T6细胞自噬
【出 处】:
【作 者】:
王美娇
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徐军全
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王明亮
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宋彬妤
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吴惠文
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康杰
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刘晓玲
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【摘 要】目的 研究脂多糖(LPS)对大鼠肝星状细胞系HSC-T6自噬的影响及NF-κB通路在其中的作用.方法 1)常规培养的HSC-T6细胞以不同质量浓度(0、0.01、0.1、1和10 mg/L)的LPS分别处理不同时间(0、3、6、12、18和24 h)后,Western blot检测细胞内微管相关蛋白轻链Ⅱ(LC3Ⅱ)及Beclin1含量;2)常规培养的HSC-T6细胞随机分为对照组、LPS组、PDTC组、LPS+PDTC组、PMA组和LPS+PMA组,各组经相应处理后,Western blot检测各组LC3Ⅱ及Beclin1含量;免疫荧光法观察NF-κB P65细胞内分布情况;比色法检测各组细胞培养上清羟脯氨酸(Hyp)含量;ELISA检测细胞培养上清层黏蛋白(LN)及透明质酸(HA)含量.结果 经LPS处理后HSC-T6细胞中LC3Ⅱ及Beclin1含量增加且在LPS质量浓度为0.1 mg/L作用6 h达到峰值,同时细胞培养上清中肝纤维化指标Hyp、LN和HA含量明显增加(P<0.05);经PDTC预处理后,LPS刺激的HSC-T6中LC3Ⅱ及Beclin1含量增加,上清中Hyp、LN和HA含量明显降低(P<0.05);而经PMA预处理则LC3Ⅱ、Beclin1含量降低而Hyp、LN和HA含量增加(P<0.05).结论 LPS可促进HSC-T6细胞自噬及NF-κB通路的活化,NF-κB的活化可能抑制HSC-T6细胞自噬.
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