MCPIP1诱导乳腺癌细胞系MDA-MB-231细胞周期停滞
【出 处】:
【作 者】:
鹿文葆
刘明明
修瑞娟
中国医学科学院北京协和医学院微循环研究所
北京100005
【摘 要】目的研究单核细胞趋化蛋白诱导蛋白1(MCPIP1)在乳腺癌细胞MDA-MB-231中的作用及机制。方法用脂质体转染法转染细胞,在MDA-MB-231中分别过表达,或敲低MCPIP1并筛选稳定表达shRNA的单克隆;MTT法检测细胞增殖;流式细胞计量技术检测细胞周期;实时荧光定量PCR(q-PCR)检测靶基因半衰期;RNA免疫沉淀法(RNA-IP)检测MCPIP1结合的靶基因;荧光素酶报告基因实验检测调节基因3'非编码区(3'UTR)的能力。结果过表达MCPIP1可显著抑制MDA-MB-231细胞增殖(P〈0.05),敲低MCPIP1显著促进细胞增殖(P〈0.05);并分别显著增加或降低G1期细胞百分比(P〈0.01);MCPIP1显著降低细胞周期素依赖性激酶2(CDK2)、细胞周期素依赖性激酶6(CDK6)、cyclin D1和cyclin E1 mRNAs的半衰期(P〈0.01);MCPIP1结合细胞周期相关基因(P〈0.05);MCPIP1显著降低含不同3'UTR的报告基因荧光素酶活性(P〈0.05)。结论MCPIP1在乳腺癌细胞MDA-MB-231中发挥抑癌作用,诱导细胞周期G_1期停滞可能是其发挥抑癌功能的机制之一。
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