槐定碱抑制脂多糖诱导巨噬细胞系NF-κB表达
【出 处】:
【作 者】:
杨峰
[1] ;
周娅
[1] ;
曹相原
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王艳荣
[1] ;
赵建宁
[1] ;
王宁萍
[1]
【摘 要】目的观察槐定碱对LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞IKKB,IκBα,NF-κBP65及TNF-α表达的影响,探讨其抗内毒素机制。方法培养RAW264.7巨噬细胞,分为对照组、槐定碱对照组、LPS组及槐定碱干预组。槐定碱干预组加入LPS100wg/L孵育1h,弃去LPS后加入槐定碱15.63mg/L,作用5、30、60和120min,分别获取细胞与培养液。RT—PCR与Westernblot分别检测NF-κB等的mRNA与蛋白表达,放免法检测培养液中TNF-α含量。结果LPS组各时间点IKKβ、pIκBα、NF-κBP65mRNA和/或蛋白表达及TNF-α含量均显著高于同时间点对照组(P〈0.01),IKBamRNA低于同时间点对照组(P〈0.01或P〈0.05);槐定碱干预组以上因子mRNA和/或蛋白表达及TNF-α含量均较同时间点LPS组显著回落(P〈0.01或P〈0.05),而IκBαmRNA则显著升高(P〈0.01或P〈0.05)。结论槐定碱调控LPS激活的巨噬细胞NF-κB通路IKK[3、IKBα、NF—κBP65等分子的表达,进而抑制下游TNF-α分泌是其抗内毒素作用机制之一。
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