CVB3腺病毒载体疫苗Ad/VP1的构建及免疫小鼠的效果
【出 处】:
【作 者】:
李嘉
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李剑
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温婵
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羡鲜
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张永红
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金玉怀
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王永祥
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【摘 要】目的构建柯萨奇病毒B3(CVB3)VP1基因重组腺病毒疫苗Ad/VP1,并观察其对小鼠的免疫效果。方法利用AdEasy-1系统构建、包装重组腺病毒Ad/VP1,Western blot法检测目的蛋白的表达。BALB/c小鼠随机分为Ad/VP1、Ad和PBS 3组,肌肉注射免疫,共2次,间隔16 d。用ELISA法和微量中和试验法分别检测血清CVB3 VP1IgG和中和抗体滴度;CCK-8法检测特异性CTL杀伤活性;用致死量CVB3攻击小鼠后,检测血中病毒滴度并观察小鼠的存活率。结果成功构建、包装了重组腺病毒Ad/VP1,并在293细胞中检测到VP1蛋白的表达。末次免疫小鼠后,Ad/VP1组血清CVB3 VP1 IgG滴度为168.3±1.4、中和抗体水平为31.8±1.4,均明显高于PBS和Ad对照组(P〈0.01),CTL杀伤活性和对小鼠的保护率也高于对照组(P〈0.05),血清病毒滴度低于两对照组(P〈0.05)。结论重组腺病毒疫苗Ad/VP1能显著提高小鼠的细胞和体液免疫应答及免疫保护作用。
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