乳腺癌细胞源Exosomes在促肿瘤血管生成中的作用及机制
【出 处】:
【作 者】:
隆霜
;
谢莹珊
;
陈黎
;
姜蓉
;
王亚平
;
沈宜
【摘 要】目的观察乳腺癌细胞源Exosomes对脐静脉内皮细胞(HUVECs)的生物学效应,初步探讨肿瘤细胞源Exo.somes在恶性肿瘤血管病理新生中的作用。方法收集乳腺癌MDA-MB-231细胞培养上清液,以超速及密度梯度离心提取Exosomes;MTr法检测细胞增殖;用流式细胞仪测定细胞周期;Transwell小室法检测迁移能力;基质胶成管实验观察成管结构的形成;PCR检测EGFR及VEGFmRNA表达;用ELISA及Westernblot检测细胞EGFR及其下游ERK、Akt及VEGF/VEGFR2表达。结果乳腺癌MDA—MB-231细胞源Exosomes以时间.剂量依赖性促进HUVECs细胞增殖(P〈0.05)。并且,在作用24h后,S期细胞比例增加,G1/S期细胞比例下降(P〈0.05);同时,HUVEC迁移及体外管腔形成能力显著提高(P〈0.05)。并且MDA-MB-231源Exosomes促进了HUVECs细胞EGFR蛋白的表达,使得磷酸化ERK与Akt蛋白的表达增加,同时促进了VEGF蛋白的分泌,并促进了VEGF/VEG—FR2蛋白表达(P〈0.05)。结论乳腺癌细胞源Exosomes促进HUVECs的增殖、迁移及体外成管能力,其机制可能与EGFR蛋白与其下游MAPK/ERK和P13K/Akt信号通路的持续活化,以及VEGF/VEGFR2蛋白的表达有关。