HMGB1-TLR4促进缺氧复氧介导的大鼠肾小管上皮细胞凋亡
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【摘 要】目的 研究缺氧复氧后大鼠肾小管上皮细胞中高迁移率族蛋白1(HMGB1)和Toll样受体4(TLR4)的表达及其在肾小管上皮细胞凋亡中的调控机制.方法 大鼠原代肾小管上皮细胞(PTECs)置于6孔L培养板培养,随机分为对照组(control)、缺氧复氧组(A/R)、HMGB1抗体处理组(A/R+ HMGB1)和TLR4抗体处理组(A/R+ TLR4)(每组n=3).用RT-PCR检测HMGB1和TLR4 mRNA的表达;Western blot法检测HMGB1、TLR4及凋亡相关分子Bcl-2、Bax、CHOP和caspase-8的蛋白表达;流式细胞术检测细胞凋亡.结果 A/R组HMGB1和TLR4的mRNA和蛋白的表达水平较对照组均显著上调(P<0.01),细胞凋亡水平较对照组显著增加(P<0.01),凋亡相关分子Bax、CHOP和caspase-8蛋白表达水平较对照组显著增加(P< 0.01),Bcl-2蛋白表达较正常对照组下调(P<0.05).经抗体处理后,HMGB1抗体处理组和TLR4抗体处理组PTECs细胞凋亡水平较缺氧复氧组显著下降(P<0.05),凋亡相关分子Bax、CHOP和caspase-8蛋白表达水平较缺氧复氧组下降(P<0.05),Bcl-2蛋白表达变化不明显.结论 HMGB1-TLR4轴可促进缺氧复氧介导的大鼠肾小管上皮细胞凋亡.
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