姜黄素对鼻咽癌细胞系CNE-1 RECK基因表达及甲基化的影响
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【摘 要】目的 探讨姜黄素对鼻咽癌细胞RECK基因表达及甲基化的影响,并探讨可能的机制。方法 体外培养鼻咽癌细胞系CNE-1,用1,10和30μmol/L 姜黄素处理后,用Western blot和实时定量PCR分别检测RECK基因以及DNA甲基化酶1(DNMT1)蛋白和mRNA表达;高效液相色谱-电喷雾质谱检测RECK甲基化,同时用MTT检测CNE-1细胞增殖,EMSA法检测核转录因子Sp1的DNA结合活性。结果 CNE-1细胞未刺激时RECK表达水平较低,而经1-30μmol/L 姜黄素处理后,能显著增强RECK蛋白和mRNA的表达(P〈0.05)。30μmol/L 姜黄素处理CNE-1细胞后, RECK启动子甲基化水平降低至31% (P〈0.05),全基因组甲基化水平降低39% (P〈0.05),细胞核的甲基化活性减少了71.6% (P〈0.05)。同时,姜黄素能显著降低CNE-1细胞中DNMT1蛋白和mRNA表达 (P〈0.05),也能减低CNE-1细胞的存活率 (P〈0.05)。此外, EMSA结果显示,姜黄素处理后,CNE-1细胞中Sp1的DNA活性显著降低。结论 姜黄素可能通过能上调RECK基因表达,降低细胞内甲基化水平,从而可能发挥对CNE-1细胞生长。
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