小RNA干扰PCBP2在神经胶质瘤细胞中对跚相关基因的调节和对细胞增殖的影响
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【摘 要】目的探索多聚胞嘧啶结合蛋白2(PCBP2)表达下调对相关基因和胶质瘤细胞增殖的影响。方法3株神经胶质瘤细胞系(T98G、U87MG和U251)各分为2组,分别转入特异性靶向PCBP2基因的小干扰RNA(siRNA)和对照siRNA,用Western blot法检测siRNA对PCBP2蛋白的抑制效果及对P53蛋白和它的两个靶基因PUMA和BAX的表达影响,同时检测P53共调节因子FHL2和同家族成员FHL1表达变化。用生物素pull—down分析PCBP2是否和FHL家族成员mRNA结合。用5.溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)掺入法检测细胞增殖能力,Hoechst染色观察细胞凋亡率。结果PCBP2siRNA转染这3株细胞后使PCBP'2蛋白表达水平明显下调(P〈0.05);增加P53及它的靶基因PUMA和BAX的蛋白表达(P〈0.05);抑制FHL2蛋白(P〈0.05),但并不结合其mRNA的3’非编码区(3’UTR);BrdU阳性细胞减少(P〈0.05);Hoechst染色阳性细胞增多(P〈0.05)。结论抑制PCBP2表达可以增强胶质瘤细胞中P53通路活性,并减弱细胞增殖能力,诱导细胞凋亡。
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