重组腺病毒Ad—IL-12感染淋巴细胞对人卵巢癌细胞SKOV3增殖和凋亡的影响
【出 处】:
【作 者】:
王秦
[1] ;
成凤
[1] ;
匡文斌
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董晋豫
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马婷婷
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熊海玉
[1] ;
涂植光
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【摘 要】目的探讨重组腺病毒Ad—IL-12感染人外周血淋巴细胞后对人卵巢癌细胞SKOV3周期、增殖和凋亡的影响。方法采用重组人IL-2腺病毒(Ad—IL-12)感染人外周血淋巴细胞,感染48h后与人卵巢癌细胞SKOV3共培养(SKOV3/Ad—IL-12),同时设未感染组(SKOV3)和Ad—GFP空载感染组(SKOV3/Ad—GFP)作为对照。RT—PCR检测IL-12双亚基P35和P40的mRNA表达,ELISA检测细胞培养上清中IL-12P70蛋白的分泌,CCK8法检测卵巢癌细胞增殖,流式细胞术分析卵巢癌细胞周期和凋亡,RT—PCR和Westernblot检测抗凋亡蛋白BCL-2、survivin的表达。结果重组腺病毒Ad-IL—12可成功感染人外周血淋巴细胞,分泌较高水平的IL-12 P70蛋白;淋巴细胞过表达IL-12可抑制SKOV3细胞的增殖;与未感染组和空载组相比,SKOV3/Ad—IL-12组G1期细胞显著增加,凋亡率显著升高(P〈0.05),SKOV3细胞中抗凋亡蛋白BCL-2和survivin显著下调(P〈0.05)。结论人IL—12基因重组腺病毒可以成功感染人外周血淋巴细胞,分泌IL-12 P70蛋白,并可以通过阻滞细胞周期进程和促进细胞凋亡抑制人卵巢癌细胞SKOV3的增殖。
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