过表达DJ-1减轻鱼藤酮引起MN9D细胞线粒体损伤和细胞凋亡
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【摘 要】目的观察过表达DJ-1蛋白能否保护MN9D细胞抵抗鱼藤酮所致的线粒体损伤和细胞凋亡。方法在MN9D细胞中分别过表达野生型DJ-1(wT)和L166P突变型DJ-1(L166P),随后给予鱼藤酮处理。MTI"法观察细胞活力、JC-1染色观察线粒体膜电位(△ψm)以及流式细胞仪AnnexinW+PI染色和TUNEL染色观察凋亡。结果单纯鱼藤酮处理组细胞活力下降48.2%±6.4%,而过表达wT时,加入鱼藤酮后细胞活力仅下降22.0%±3.7%(P〈0.05),过表达L166P组跟单纯鱼藤酮组无显著性差异;鱼藤酮引起MN9D细胞△蚧下降,过表达WT则可以部分恢复△ψm,L166P无此作用;过表达wT.DJ-1组凋亡率分别为5.4%和9.7%,较单纯鱼藤酮处理明显下降(P〈0.05),而转染L166P细胞凋亡率跟鱼藤酮组无差异,TUNEL实验证实了同样的结果。结论过表达野生型DJ-1能缓解鱼藤酮对MN9D细胞的损伤,具有线粒体保护功能,减少细胞凋亡的发生,而突变型L166P则无此作用。