下调GINS2表达抑制HL60细胞周期调控因子
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【摘 要】目的观察下调GINS2的表达后对人白血病细胞系HL60周期调控因子的变化并探讨其机制。方法脂质体介导并稳定转染干扰质粒的细胞为干扰组,转染阴性对照质粒的细胞为阴性对照组,只加入脂质体的细胞为空白对照组,未转染的HL60细胞为未处理组。集落形成实验测定细胞增殖;流式细胞术分析细胞周期;3H—TdR掺入实验检测细胞DNA合成;Westernblot检测CDK1、cyclinB1等蛋白;RT—PCR检测ATM,CHK2,P53等mRNA水平;Westernblot检测其蛋白水平。结果和其他3组相比,干扰组细胞G:期细胞数明显增加、DNA合成受阻、增殖减慢。与G2期相关周期调控蛋白CDK1,cyclinB1的表达随时问变化而明显降低。和其他3组相比,干扰组细胞ATM,CHK2,P53转录水平和翻译水平显著上调。结论下调G1NS2表达后可抑制HL60细胞DNA复制并影响其G2期进程,机制可能与ATM,CHK2,P53等基因相关。
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