人生长激素启动子调控TNF—α表达载体的构建及体外靶向基因治疗垂体生长激素腺瘤
【出 处】:
【作 者】:
【摘 要】目的构建人生长激素启动子(hGHp)调控的基因治疗载体pSNAV2.0-hGHp—TNFα并探索其对体外垂体生长激素腺瘤的抑制作用。方法以pSNAV2.0-hGHp-EGFP和pSNAV2.0-TNFα为基础通过酶切、连接反应构建pSNAV2.0-hGHp-NFα,用脂质体转染法验证hGHp的靶向转录活性,用ELISA检测治疗基因TNFa的表达并用MTF法检测体外TNFα基因表达对垂体生长激素腺瘤的抑制作用。结果所得质粒pSNAV2.0-hGHp-TNFα的测序结果正确;pSNAV2.0-hGHp-EGFP只在GH3细胞检测到绿色荧光而在对照细胞中未检测到绿色荧光;转染了pSNAV2.0.hGHp—TNFα的实验组中GH3细胞的生长较对照组明显受抑制(P〈0.05)。结论首次成功构建了质粒pSNAV2.0LhGHp—TNFα,且其可以明显抑制体外垂体生长激素腺瘤的生长。
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