P38MAPK信号通路参与BMP-13诱导C3H10T1/2细胞向心肌样细胞分化
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【摘 要】目的探讨P38MAPK对BMP-13诱导C3H10T1/2细胞向心肌样细胞分化的影响。方法实验共4个部分,分组如下:1)BMP-13腺病毒(Ad-BMP-13)对P38MAPK的作用:Ad-BMP-13转染组、Ad-GFP转染组和C3H10空白组。Westernblot检测磷酸化P38MAPK(p-P38MAPK)和总P38MAPK(t-P38MAPK)的表达变化,免疫荧光技术定位P.P38MAPK;2)P38MAPK干扰腺病毒(Ad-si-P38)对P38MAPK的作用:si-P38干扰组、si-NC干扰对照组和C3H10空白组。Westernblot检测t-P38MAPK的表达;3)Ad-si-P38阻断P38MAPK后对BMP-13诱导分化的影响:si-P38+Ad-BMP-13转染组、si-NC+Ad-BMP-13转染组、si-NC+Ad-GFP转染组和C3H10空白组。Westernblot检测cTnT和Cx43的表达,荧光定量PCR检测GATA-4和MEF-2C的mRNA表达;4)SB203580阻断P38MAPK后对BMP-13诱导分化的影响:DMSO+Ad-BMP-13转染组、SB203580(2、5和1μmol/L)+Ad-BMP-13转染组。荧光定量PCR检测翻纠4和MEF-2C的mRNA表达。结果BMP-13促进P38MAPK的磷酸化。Ad-si-P38可以有效降低P38MAPK表达水平。Ad-si-P38阻断P38MAPK后BMP-13诱导组cTnT、Cx43表达有明显降低(P〈0.05),GATA-4和MEF-2C的表达也有显著降低(P〈0.05)。随P38MAPK特异性抑制剂SB203580浓度增加,BMP-13诱导组GATA-4和MEF-2C的表达降低(P〈0.05)。结论Ad-BMP-13可以通过激活P38MAPK信号通路来调控C3H10T1/2细胞向心肌样细胞分化。