高效制备人诱导多能干细胞并诱导分化为心肌细胞
【出 处】:
【作 者】:
【摘 要】目的提高人诱导性多能干细胞(hiPSC)转化效率,缩短其产生周期,并避免引入异源基因。方法利用GP2-293反转录病毒包装系统对人包皮成纤维细胞(HFFs)进行转化,引入小分子物质,并对类胚胎干细胞(ESC)克隆进行独立培养,检测标记蛋白,定向诱导分化能力和核型分析。结果 HFFs经转化后,20 d出现形态与ESC克隆相似的hiPSC,比经典法缩短了10 d,效率提高约12倍。它们与ESC同样表达标记蛋白;体外成功定向分化为心肌细胞。核型分析表明该hiPSC染色体核型正常。结论建立稳定的转化效率高、周期短的hiPSC生成体系,并成功诱导分化成心肌细胞,为心血管疾病的模型构建和临床研究提供实验基础。