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【摘 要】目的观察用RNA干扰（RNAi）下调SMMC-7721人肝癌细胞系P53表达后对细胞增殖及P21蛋白表达的影响。方法设计合成P53基因的短发夹RNA（shRNA）,并构建pGPU6/GFP/Neo-P53 shRNA重组质粒。重组质粒转染SMMC-7721细胞,经G418抗性筛选获得阳性克隆。克隆形成实验观察细胞的增殖,RT-PCR法及Western blot法分别检测P53、P21的mRNA及蛋白表达。BALB/c裸鼠皮下注射SMMC-7721细胞,建立移植瘤模型,瘤部位多点注射pGPU6/GFP/Neo-P53 shRNA,观察瘤体积变化和瘤重。结果 P1、P2、P3 3条P53 shRNA均可明显降低P53mRNA水平（P〈0.05,P〈0.05,P〈0.01）;干扰P53表达明显升高SMMC-7721细胞克隆形成率（P〈0.05）,P21mRNA和蛋白的表达均随着P53的沉默而显著降低（P〈0.05）。P53 shRNA明显增加裸鼠移植瘤的体积和重量（P〈0.05）。结论 shRNA干扰P53基因可抑制P53和P21蛋白表达,使癌细胞恶性增殖。