外源EGFP表达对肿瘤细胞体外生物学行为的影响
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【摘 要】目的探讨常用的可视化细胞标记技术-外源EGFP表达对肿瘤细胞生物学行为的影响。方法选择不同的携带EGFP的载体,利用脂质体转染或慢病毒感染技术,在不同肿瘤细胞系中表达外源EGFP,筛选稳定表达外源EGFP的细胞系,MTr法检测细胞体外增殖能力;细胞分析计数仪(CasyTr型)检测细胞大小;Transwell体外迁移实验检测细胞体外侵袭能力。结果成功建立了稳定表达外源EGFP的人结肠癌细胞系HCT116.GFP、HCT116--EG.FP、COL0320DM-EGFP和小鼠树突状细胞肉瘤细胞系DG6-EGFP。HCT116-EGFP细胞、COL0320DM-EGFP细胞和DG6.EGFP细胞的体外增殖能力明显降低;HCT116-EGFP细胞体积增大:平均直径分别为(14.53±0.07)um(HCT116)和(18.28±0.16)um(HCT116.EGFP)(P〈0.01);HCT116-EGFP细胞的体外侵袭能力明显降低(P〈0.01)。结论外源EGFP可视化标记细胞后,可能会影响肿瘤细胞的生物特性,利用这些模型进行科研时,需注意对相关指标的影响。
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