siRNA阻断鼠成肌细胞myostatin表达对细胞增殖及分化能力的影响
【出 处】:
【作 者】:
孙顺昌
[1] ;
彭运生
[1] ;
贺敬波
[1] ;
林志坚
[2]
【摘 要】目的研究myostatin表达被阻断后鼠成肌细胞的增殖及分化能力。方法构建可阻断myostatin表达的siRNA表达载体,并转染鼠成肌细胞,用实时荧光定量RT-PCR和Western印迹鉴定myostatin表达。培养myostatin表达被阻断的成肌细胞,计数不同时间的细胞数和测定细胞表达的肌酸激酶。使用诱导分化培养液培养myostatin表达被阻断的成肌细胞,观察其分化成肌管的能力。结果siRNA表达载体对成肌细胞myostatin表达的干扰率为81.6%,其干扰效果也被Western印迹所证实。Myostatin表达被阻断的成肌细胞数目增加(P〈0.05),细胞内肌酸激酶活力升高(P〈0.05)。正常成肌细胞培养7d可分化成肌管,myostatin表达被阻断后需10d才分化成肌管。结论siRNA表达载体阻断成肌细胞的myostatin表达后细胞的增殖能力增强,分化被延迟,或许可成为治疗肌肉萎缩的一种新途径。